[分享]熒光分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)與工作原理 [復(fù)制鏈接]

由熒光的發(fā)光原理可知，分子熒光光譜與激發(fā)光源的波長無關(guān)，只與熒光物質(zhì)本身的能級結(jié)構(gòu)有關(guān)，所以，可以根據(jù)熒光譜線對熒光物質(zhì)進(jìn)行定性分析鑒別。 照射光越強(qiáng)，被激發(fā)到激發(fā)態(tài)的分子數(shù)越多，因而產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度越強(qiáng)，測量時(shí)靈敏度越高。一般由激光誘導(dǎo)熒光測量物質(zhì)的特性比由一般光源誘導(dǎo)熒光所測的靈敏度提高2-10倍。 &x =}
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當(dāng)紫外光或波長較短的可見光照射到某些物質(zhì)時(shí)，這些物質(zhì)會發(fā)射出各種顏色和不同強(qiáng)度的可見光，而當(dāng)光源停止照射時(shí)，這種光線隨之消失。這種在激發(fā)光誘導(dǎo)下產(chǎn)生的光稱為熒光，能發(fā)出熒光的物質(zhì)稱為熒光物質(zhì)。 i1e|UR-wl  
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熒光分光光度計(jì)基本結(jié)構(gòu) '!>LF1W=  
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1. 樣品室：通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時(shí)，光源與檢測器成直角安排；測量固體時(shí)，光源與檢測器成銳角安排。 h W\q  
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2.激發(fā)單色器：置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或第一單色器，篩選出特定的激發(fā)光譜。 [1K\ _  
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3．發(fā)射單色器：置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器，常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。 H,bYzWsrPo  
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4.光源：為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈，后者能發(fā)射出強(qiáng)度較大的連續(xù)光譜，且在300nm～400nm 范圍內(nèi)強(qiáng)度幾乎相等，故較常用。 dY'/\dJ  
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5.檢測器：一般用光電管或光電倍增管作檢測器�？蓪⒐庑盘柗糯蟛⑥D(zhuǎn)為電信號。 x?v/|  
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分子的吸收光譜和產(chǎn)生熒光的機(jī)制：當(dāng)物質(zhì)分子吸收某些特征頻率的光子以后，可由基態(tài)躍遷至第一或第二電子激發(fā)態(tài)中各個(gè)不同振動能級和各個(gè)不同轉(zhuǎn)動能級。處于激發(fā)態(tài)的分子通過無輻射弛豫（例如，與其它分子碰撞過程中消耗能量，或者，對分子組織而言，誘發(fā)光化反應(yīng)而消耗能量等）降落至第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級，然后再由這個(gè)最低振動能級以輻射弛豫的形式躍遷到基態(tài)中各個(gè)不同的振動能級，發(fā)出分子熒光。然后再無輻射弛豫至基態(tài)中最低振動能級。 +L D\~dcV+  
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