| moonljy |
2005-11-03 14:04 |
醫(yī)用顯微鏡應(yīng)用的若干光學(xué)技術(shù)
醫(yī)用顯微鏡是對(duì)微小物體，如人體組織、細(xì)胞、血球以及細(xì)菌、病毒等進(jìn)行觀測(cè)和分析的光學(xué)儀器。一個(gè)生物體放大1000倍后，就可以進(jìn)行組織（組織學(xué)）和細(xì)胞（細(xì)胞學(xué)）以及病理（病理學(xué)）的診斷和研究。 (o)nN8
標(biāo)準(zhǔn)的光學(xué)顯微鏡通常由目鏡和物鏡兩個(gè)部分組成光學(xué)系統(tǒng)，主要是凹凸透鏡的組合使用。物體經(jīng)目鏡和物鏡二次放大，所以顯微鏡的放大率是目鏡和物鏡放大率的乘積。同時(shí)，通過(guò)光路計(jì)算可得出，顯微鏡的鏡筒愈長(zhǎng)，目鏡與物鏡的焦距愈短，放大率就愈大。 H>_ FCV8
顯微鏡的另一個(gè)重要特性是分辨能力，分辨率是由物鏡的數(shù)值孔徑（NA）決定的，NA一般為0.65，最大為1.5~1.6。數(shù)值孔徑越大，分辨能力就越高。 )VQ:L:1t(
但是，顯微鏡能夠獲得的最高放大倍數(shù)是受到可見(jiàn)光的波長(zhǎng)限制的。因?yàn)榭梢?jiàn)光的波長(zhǎng)范圍是從400到700 nm（0.4~0.7 μm），所以能夠分辨的最小物體約為1 μm直徑。由于大多數(shù)細(xì)胞的直徑是5~50 μm，因此，光學(xué)顯微鏡是適合于分辨大于亞細(xì)胞的所有物體。并且，通過(guò)光學(xué)技術(shù)的組合運(yùn)用，光學(xué)顯微鏡的最高分辨率可以提高到0.2 μm左右。一般地說(shuō)，提高物鏡的分辨率有兩種方法：一種是把物鏡浸在油或水里，來(lái)增加其數(shù)值孔徑，另一種是利用波長(zhǎng)短的光，如紫外線，可把分辨率提高一倍。 ;H /*%2
在光學(xué)顯微鏡的光學(xué)操作中，使用三個(gè)基本原理：反射、折射和衍射。 B5*{85p(u
1. 相襯顯微鏡技術(shù)——因?yàn)榇蠖鄶?shù)細(xì)胞對(duì)于所有波長(zhǎng)的可見(jiàn)光是透明的（除了血紅細(xì)胞以外），所以薄的組織切片在顯微鏡下是看不到什么的。為了分辨不同的細(xì)胞，通常需要用強(qiáng)烈吸收某些波長(zhǎng)可見(jiàn)光的化學(xué)品（如染料）把它們?nèi)旧煌幕瘜W(xué)品用于染不同的細(xì)胞成分，從而得以幫助辨認(rèn)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。但是，染色的程序相當(dāng)繁雜，并且有時(shí)會(huì)傷害有機(jī)體的生命力。 FYR%>Em
有一種光學(xué)技術(shù)是利用細(xì)胞不同部分的不同折射率。因?yàn)楣庠诩?xì)胞的不同部分以不同的速度傳播，所以光波的相位關(guān)系在經(jīng)過(guò)樣品時(shí)就會(huì)改變，相襯顯微鏡就利用了這個(gè)折射現(xiàn)象使細(xì)胞結(jié)構(gòu)得以見(jiàn)到而不用染色。這類顯微鏡主要是在直射光的會(huì)聚點(diǎn)處增加一塊透明的平行平面板，來(lái)增加板像的襯度，以便分辨。實(shí)用上是采取方形、十字形、環(huán)形的相板，而環(huán)形相板用得最多。它是在平行平面板上鍍覆一層或多層氧化鎂或冰晶石（氟化鋁和氟化鈉）薄膜制成。 ,
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