(一) 原理和結構特點
aWRi`poZT 在日常生活中,室內飛揚的微;覊m是不易被看見的,但在暗的房間中若有一束光線從門縫斜射進來,灰塵便粒?梢娏耍@是
光學上的丁達爾現(xiàn)象。暗視野
顯微鏡就是利用此原理設計的。它的結構特點主要是使用中央遮光板或暗視野聚光器,常用的是拋物面聚光器,使光源的中央光束被阻擋.不能由下而上地通過標本進入
物鏡。從而使光線改變途徑,傾斜地照射在觀察的標本上,標本遇光發(fā)生反射或散射,散射的光線投入物鏡內,因而整個視野是黑暗的。在暗視野中所觀察到的是被檢物體的衍射光圖像.并非物體的本身,所以只能看到物體的存在和運動,不能辨清物體的細微結構。但被檢物體為非均質時,并大于1/2波長,則各級衍射光線同時進入物鏡,在某種程度上可觀察物體的構造。一般暗視野顯微鏡雖看不清物體的細微結構,但卻可分辨0.004um以上的微粒的存在和運動,這是普通顯微鏡(最大的分辨力為0.2um)所不具有的特性,可用以觀察活細胞的結構和細胞內微粒的運動等。
6?%$e$s (二) 制作中央遮光板
H/M]YUs/3 普通顯微鏡只要聚光器是可以拆卸的,支架的口徑適于安裝暗視野聚光器,即可改裝成暗視野顯微鏡。在無暗視野聚光器時,可用厚黑紙片制作一個中央遮光板,放在普通顯微鏡的聚光器下方的濾光片框上,也能得到暗視野效果。
km9#lK 1.將顯微鏡聚光器調到最高位置,用低倍鏡對好
焦距。
Kgi`@` 2.取下
目鏡,從鏡筒中觀察并調節(jié)光闌的大小,使其與鏡筒中所見物鏡的視野相等。
/v<Gt%3X 3.用厚黑紙剪制中央擋光板。外圈直徑與濾光片框架相同,中央部分的大小與調節(jié)好的光闌孔徑一樣(可用半透明的小紙片,放在通光孔處聚光鏡鏡面上,紙上顯示的光斑即為光闌的孔徑,再用圓規(guī)量取大小)。
h>*3i# 4.將中央擋光板放在濾光片框架上,開大光闌進行樣品觀察。
,N,@9p 如需使用高倍鏡作暗視野觀察,應按高倍鏡對焦后的視野大小重新制作中央擋光板。
3=oxT6"k 保存好各自制作的中央遮光板,以便在后面的實驗中使用。
|pBFmm* (三)使用方法
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